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產(chǎn)品名稱:總巰基含量檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:BC1375

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:總巰基含量檢測試劑盒
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細菌和真菌等生物體,是催化木聚糖類半纖維素降解的關(guān)鍵酶,產(chǎn)物木糖可作為碳源應用于微生物發(fā)酵。另外,β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應用于造紙工業(yè),比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保,具有廣泛的應用價值。

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BC1375總巰基含量檢測試劑盒的詳細資料:

總巰基含量檢測試劑盒

生物體內(nèi)巰基主要包括谷胱甘肽巰基和蛋白質(zhì)巰基。前者不僅能夠修復氧化損傷的蛋白質(zhì),而且參與活性氧清除,后者對于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象具有重要作用。通過測定總巰基含量和 GSH 含量,能夠間接測定蛋白質(zhì)巰基含量。

巰基基團與 5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應,生成黃色化合物,在 412nm 處有吸收峰。

總巰基含量檢測試劑盒

樣品的制備:

1. 按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液)進行冰浴勻漿,然后 8000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

2. 血清,培養(yǎng)液:直接測定。

操作步驟:

1、 分光光度計/酶標儀預熱 30min,調(diào)節(jié)波長 412nm,蒸餾水調(diào)零。

2、操作表對照管 測定管樣品(μL) 40 40 試劑一(μL) 150 150 試劑二(μL) 10 H2O(μL) 10 混勻,25℃靜置 10min,于微量石英比色皿/96 孔板,測定 412nm 吸光值。ΔA=A 測定-A 對照。

計算公式:

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下總巰基標準曲線:y = 1.7236 x,R 2 = 0.9994

1. 組織:

(1)按樣本重量計算總巰基含量(μmol/g)= 1.7236 ?A ×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)= 2.9×ΔA÷W

(2)按樣本蛋白濃度計算總巰基含量(μmol/mg prot)= 1.7236 ?A ×V 反總÷(V 樣×Cpr) = 2.9×ΔA÷Cpr

2. 血清、培養(yǎng)液:

總巰基含量(μmol/L)= 1.7236 ?A ×V 反總÷V 樣×103 =2900×ΔA V 反總:反應總體積,0.2mL;V 樣:反應中樣品體積,0.04mL;V 樣總:加入提取液體積, 1mL;W:樣品質(zhì)量,g ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;103 :1mmol/L=103 μmol/ L

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

總巰基標準曲線:y = 0.8618x,R 2 = 0.9994 1.

組織:(1)按樣本重量計算總巰基含量(μmol/g)= 0.8618 ?A ×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)=5.8×ΔA÷W

(2)按樣本蛋白濃度計算總巰基含量(μmol/mg prot)= 0.8618 ?A ×V 反總÷(V 樣×Cpr)=5.8×ΔA÷Cpr

2. 血清、培養(yǎng)液:總巰基含量(μmol/L)= 0.8618 ?A ×V 反總÷V 樣×103 =5800×ΔA V 反總:反應總體積,0.2mL;V 樣:反應中樣品體積,0.04mL;V 樣總:加入提取液體積, 1mL;W:樣品質(zhì)量,g ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;103 :1mmol/ L=103 μmol/ L

 

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